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1.3: Micropipeta - Biología

1.3: Micropipeta - Biología


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Objetivos de aprendizaje

Metas:

  • Utilice varios instrumentos que se encuentran en el laboratorio de biotecnología.
  • Mide el volumen con precisión y exactitud.
  • Pipetee con precisión y exactitud.
  • Aprenda a usar una micropipeta para medir volúmenes muy pequeños.

Resultados de aprendizaje de los estudiantes:

Al completar esta práctica de laboratorio, los estudiantes podrán:

  • Realice mediciones precisas y precisas con micropipetas y pipetas serológicas.
  • Calcule el porcentaje de error para una medida determinada.
  • Leer, configurar y operar una micropipeta.
  • Determine qué pipeta se debe utilizar para medir un volumen específico.
  • Determina la precisión con la que puedes medir con cada micropipeta.

Introducción a la micropipeta:

La capacidad de medir cantidades muy pequeñas, microlitros (µl), de químicos líquidos o reactivos es una habilidad fundamental necesaria en el laboratorio de biotecnología o investigación. Los científicos usan un dispositivo llamado micropipeta para medir estos volúmenes muy pequeños con precisión. Esta actividad introduce la técnica del micropipeteo. Recuerde, al igual que con todas las habilidades motoras finas, esta nueva habilidad requerirá práctica y determinación. Asegúrese de operar la micropipeta lenta y cuidadosamente.

Parte I: Elección y configuración de la micropipeta

Hay varios tamaños de micropipetas que se utilizan en el laboratorio de biotecnología. Hoy, utilizará los modelos P-1000, P-200 y P-20. El P-1000 mide volúmenes entre 100-1000 µl, el P-200 mide volúmenes entre 20-200 µl y el P-20 mide volúmenes en el rango de 2-20 µl. Es importante elegir siempre la micropipeta correcta para el volumen que se va a medir.

Si observa la Figura 3.1, puede ver que cada micropipeta tiene una ventana de visualización similar pero diferente. Para el P1000, el número rojo indica el lugar de los miles, seguido de las centenas, las decenas y las unidades que se muestran como pequeñas líneas verticales. Cada línea representa 2 µl. El P-200 se lee de manera diferente. La pantalla de arriba hacia abajo indica centenas, decenas, unidades y las líneas verticales se consideran 0,2 µl. Finalmente, el P-20 se puede leer de arriba hacia abajo decenas, unidades y décimas rojas.

A. Elección de su micropipeta

Para cada cantidad indicada a continuación, indique la micropipeta correcta necesaria para medir el volumen con precisión, luego ajuste la pipeta a la cantidad indicada y enséñele a su compañero.

Tabla 1. Elección del tamaño de la pipeta
MontoSe necesita una pipetaObservación de la pareja
  1. 567 µl:

2. 160 µl:

3. 700 µl:

4. 25 µl:

5. 15 µl:

B. Configuración de su micropipeta

Materiales

  • Micropipeta P-20
  • Consejos P-20
  • Contenedor de basura
  • Tubo de tinte rojo en rejilla para tubos
  • Hoja laminada para pipetear

Procedimiento

  1. Cada estudiante cargará 5, 10, 15 y 20 µl de tinte rojo en la hoja laminada.
  2. Localice el p-20 y ajuste el dial a 5 µl.
  3. Sostenga la micropipeta en su mano dominante y coloque de manera suave pero segura el extremo de la micropipeta en la punta del tamaño adecuado. Una vez que la punta esté encendida, tenga cuidado no tocar la punta en nada! Si su punta toca la mesa, la bata de laboratorio, etc., expulse la punta en el contenedor de desechos y obtenga una nueva punta de pipeta limpia.
  4. Con la otra mano, abra la tapa del tubo de tinte rojo y lleve el tubo de tinte rojo al nivel de los ojos.
  5. Empuje el émbolo de la micropipeta hacia abajo la primera parada y mantenga el pulgar en esta posición.
  6. Coloque la punta de la pipeta en la solución de tinte rojo.
  7. Suelte suavemente el pulgar del émbolo para extraer líquido hacia la punta.
  8. Confirme que la punta tenga líquido y que no haya burbujas dentro de la punta.
  9. Cierre el tubo de tinte rojo y vuelva a colocarlo en la rejilla para tubos.
  10. Toque suavemente con la punta el centro del círculo etiquetado 5 µL y empuje lentamente hasta el final (hasta el segundo tope) en el émbolo para dispensar el líquido.
  11. Repita este proceso para los volúmenes restantes.
  12. Asegúrese de observar a sus compañeros de grupo para proporcionar comentarios y ayudar con su técnica.

Resultados

Tome una foto o haga un dibujo de sus manchas e inclúyala en su cuaderno de laboratorio como la Figura 1. Asegúrese de que la figura tenga un título.

Conclusión

  1. Observe si sus puntos eran similares en tamaño a los de sus compañeros de grupo.
  2. ¿Qué volumen tuvo la mayor variabilidad?
  3. ¿Qué pudo haber contribuido a que tu espacio fuera demasiado grande o pequeño?

Parte II: Práctica de pipeteo

A. Arte de microplacas

Materiales

  • pipeta p20 (1)
  • micropipeta p200 (1)
  • Puntas P-20 / P-200
  • Conjunto de arte de microplacas (tarjetas de diseño, tintes de colores y microplaca de 96 pocillos) (1)
  • Balanza analítica o electrónica

Procedimiento

  1. Obtenga una microplaca de 96 pocillos, una tarjeta de diseño y tubos de tintes de colores.
  2. Escriba el número de Microplate Art Design en su cuaderno de laboratorio.
  3. Con la balanza de gramos, obtenga el peso de su microplaca de 96 pocillos y anótelo en su cuaderno.
  4. Usando la micropipeta p200 con punta, dispense 50 µl de tinte en los pocillos escritos en la tarjeta de diseño.
  5. Una vez que haya terminado de pipetear, pese la microplaca completa y anótela en su cuaderno de laboratorio.

Resultados

  1. Asegúrese de registrar su peso en gramos de su microplaca antes y después del pipeteo en su cuaderno de laboratorio.
  2. Con estos valores, calcule el porcentaje de error de la microplaca que acaba de crear. Incluya el cálculo en su cuaderno de laboratorio.
  3. Tome una fotografía del diseño de su microplaca e inclúyala en su cuaderno de laboratorio.

CONCLUSIÓN

  1. ¿Tu porcentaje de error fue inferior al +/- 5%? Si su porcentaje de error estuvo por encima de este rango, explique las posibles causas.
  2. ¿Tu patrón se veía correcto? ¿Cómo podría evitar errores en el futuro?

B. Matriz de práctica de micropipetas

Materiales

  • pipeta p20 (1)
  • micropipeta p200 (1)
  • Tubos de microcentrífuga de 1,5 ml (3)
  • Marcador permanente
  • Balanza analítica o electrónica

Procedimiento

  1. Etiquete tres tubos de microcentrífuga: 1, 2, 3,
  2. Pese cada tubo antes de colocar cualquier líquido dentro.
  3. Dibuje la tabla 2 en su cuaderno de laboratorio y utilícela para registrar sus datos.

Resultados

Tabla 2. Cálculo de la precisión para la micropipeta

# De tubo

Peso de tubo (g)

Peso de tubo + tinte (g)

Peso teórico del tinte

Real peso del tinte

% Error

1

2

3

  1. Entregue los volúmenes indicados en la Tabla 3 en cada uno de los 3 tubos etiquetados.
Tabla 3. Volúmenes a pipetear en cada tubo

# De tubo

Micropipeta

Tinte rojo (µl)

Tinte azul (µl)

Tinte verde (µl)

1

P1000

210

435

332

2

P200

110

153

67

3

P20

15

17

10

  1. Pese cada tubo después de pipetear.
  2. Determine el peso teórico del tinte usando la información sobre el peso de un ml de la solución de tinte a temperatura ambiente proporcionada por su instructor.
  3. Determine el% de error para cada tubo.

Conclusión

Según sus datos, comente lo siguiente en su cuaderno de laboratorio:

  1. ¿Qué micropipeta dio la medida más precisa?
  2. ¿Qué micropipeta dio la medición más precisa?
  3. ¿Qué pudo haber contribuido a un mayor porcentaje de errores?

Preguntas de estudio

  1. Convierta lo siguiente:
    • 345 mL = __________________ µl
    • 0,54 ml = _________________ µl
    • 5,2 L = ________________ mL
  2. ¿Qué micropipeta elegiría para medir 550 µl? 17µl? 167µl?
  3. Haga tres sugerencias que otros biotecnólogos puedan utilizar para mejorar la precisión de la micropipeta.
  4. Suponiendo que la densidad del agua es de 1 gramo por mililitro, ¿cuánto deberían pesar 550 µL de agua?
    • 17 µL de agua?
    • 167 µL de agua?
  5. ¿Cuál es la fórmula para calcular el error porcentual?
  6. ¿Cuál es el volumen máximo que puede establecer para cada micropipeta (P-1000, P-200, P-20)?

Conferencia Anual RESNA - 2014

Aproximadamente el 20% de la población activa en los Estados Unidos tiene una discapacidad (Departamento de Trabajo, 2013). Sin embargo, solo el 2,7% de la fuerza laboral de ciencia, tecnología, ingeniería y matemáticas (STEM) informa tener una discapacidad (Miner, Nieman, Swanson, Woods, 2001). Además, menos del 3% de todos los doctorados en ciencias biológicas son obtenidos por personas con discapacidad (PWD) (Supalo, Mallouk, Amorosi, Lanouette, Wohlers & amp McEnnis, 2009 NSF, 2013). Hay varios factores en las experiencias educativas de las personas con discapacidad que ayudan a explicar su subrepresentación en las profesiones STEM: falta de experiencias prácticas independientes, bajas expectativas, falta de modelos a seguir y exposición limitada a la ciencia dentro y fuera del aula (Dunn, Rabren , Taylor, & amp Dotson, 2012 Supalo, Mallouk, Amorosi, Lanouette, Wohlers & amp McEnnis, 2009). Las experiencias prácticas activas de aprendizaje de STEM en el aula de ciencias o en entornos de investigación son cruciales para el desarrollo y el éxito de los científicos (National Research Council, 1996, Stefanich, 2007). De hecho, cuando se entrevistó a estudiantes universitarios con discapacidades visuales y de movilidad, lo que les disuadió de seguir una carrera en el laboratorio no fue la falta de interés, sino la falta e inaccesibilidad de las experiencias prácticas de aprendizaje (Duerstock, 2006 Mansoor et al., 2010). .

Con el fin de proporcionar experiencias de investigación práctica para las personas con discapacidad, incluidas las personas con discapacidad visual o con discapacidad visual (BLV), es necesario que cada uno de los componentes de procedimiento de la tarea de investigación sea accesible. Debido a las necesidades previsibles de un estudiante graduado de BLV que ingresa en un campo de investigación en biología, decidimos considerar la accesibilidad de dos procedimientos comunes de biología molecular: micropipetar y transferir células cultivadas de una placa de pocillos a un portaobjetos de microscopio.

En una encuesta de la facultad de investigación en ciencias de la vida de la Universidad de Purdue, el 85% de los encuestados afirmó que la micropipeta se realizaba a diario en sus laboratorios. La micropipeta es un componente omnipresente de la mayoría de los protocolos de biología molecular, incluido el cultivo celular. Más de la mitad de los encuestados realizaron cultivos celulares al menos 2 o 3 veces por semana. En este estudio, se llevaron a cabo experimentos de prueba para demostrar la competencia de los investigadores de BLV en micropipeta y cultivo de células en un cubreobjetos de microscopio en una placa de pocillos y luego transferirlo a un portaobjetos. La micropipeta de líquidos dentro y fuera de los pozos requirió colocar la punta de la micropipeta en el medio aproximado de los pocillos cerca del fondo sin tocar el cubreobjetos. Aunque este procedimiento es comúnmente realizado por investigadores con visión normal y coordinación ojo-mano, es extremadamente difícil de realizar estando ciego. Además, la transferencia de células cultivadas desde el cubreobjetos del microscopio en la placa de pocillos a un portaobjetos normalmente se logra utilizando fórceps sin dañar las células. Esto requiere destreza fina y buena vista. Para nuestros investigadores ciegos, tanto micropipetar como retirar el cubreobjetos de la placa de pocillos con fórceps era imposible, incluso sin tener en cuenta las técnicas asépticas.

Se diseñó una guía de micropipeta colocada en la parte superior de la placa de seis pocillos para dirigir la punta a la ubicación y profundidad adecuadas. Además, la guía de micropipetas protegería contra la contaminación de los pocillos que contienen cultivos celulares. Para quitar el cubreobjetos del fondo del pocillo, se diseñó un soporte que encajaba en el fondo de la placa del pocillo con un mango que sobresalía para facilitar su extracción y transferencia. La impresión 3D facilitó un proceso de diseño iterativo rápido y económico de construcción, evaluación y rediseño de soluciones prototipo.


Protocolo

1. Prepare un espacio de trabajo estéril

Antes de comenzar cualquier procedimiento de esterilización en su área de trabajo, lávese bien las manos con jabón antiséptico y agua tibia.

Asegúrese de volver a lavarse las manos cada vez que sospeche que está contaminado por sus manipulaciones experimentales.

Elimine todos los materiales que abarrotan su área de trabajo en la mesa de laboratorio. Retire una toallita desinfectante prehumedecida del recipiente y limpie toda el área. Deje que el desinfectante se evapore, ¡no lo seque!

Utilice desinfectantes como alcohol (isopropanol o etanol al 70%) o compuestos fenólicos (o-fenilfenol).

Para prevenir aerosolización, o la producción de una fina neblina que contiene células bacterianas y la propagación de contaminantes microbianos, evite dispensar desinfectante de una botella exprimible.

La desecación de microorganismos es una de las formas más efectivas de descontaminar superficies.

Incluso si alguien ha usado recientemente la mesa de laboratorio y la superficie de la mesa fue limpiada con desinfectante, SIEMPRE comience su tiempo de laboratorio limpiando la mesa.

Una vez que el desinfectante se haya secado por completo, use un encendedor para encender el mechero Bunsen. Ajuste la llama para que se vea un cono azul en medio de la llama. La llama ahora está produciendo un corriente ascendente, o corrientes de convección de aire en las que el aire caliente se eleva y se aleja de la llama (Figura 1). A medida que aumenta el calor, los microorganismos y las partículas de polvo se elevan y se alejan del área de trabajo inmediata. Trabaje lenta, cuidadosa y deliberadamente en todo momento dentro de esta área creada por el mechero Bunsen, conocida como campo estéril. Mantenga el mechero Bunsen encendido durante todo el procedimiento.

La punta del cono azul es la parte más caliente de la llama.

Tenga cuidado de no perturbar la corriente ascendente con movimientos rápidos que cambian drásticamente las corrientes de aire alrededor de la mesa de laboratorio. La creación de una corriente ascendente con el mechero Bunsen minimiza la posibilidad de que los microorganismos y el polvo caigan sobre el banco o en botellas, tubos o frascos abiertos en el área de trabajo.

Disponga todos los suministros necesarios para el procedimiento en la mesa de laboratorio cerca del campo estéril. Asegúrese de que todos los materiales estén debidamente etiquetados.

Los suministros pueden incluir pipetas y micropipetas serológicas, tubos de cultivo estériles, matraces estériles, frascos de medios que contienen caldo, tubos de microcentrífuga estériles, puntas de micropipeta, gradillas para tubos, cultivos de células bacterianas y reservas de fagos.

Los medios líquidos deben esterilizarse en un autoclave a 121 & # x000b0C durante al menos 15 minutos en la configuración líquida. Los volúmenes más grandes de medios (& # x0003e 1L) requieren tiempos de autoclave más prolongados. El material de laboratorio debe esterilizarse en un autoclave a 121 ° C durante al menos 30 minutos en un ajuste por gravedad (seco).

En general, las soluciones estériles se pueden almacenar a 4 & # x000b0C hasta por 5 meses. Tenga en cuenta que el tiempo de almacenamiento se reduce significativamente para las soluciones que contienen componentes inestables como los antibióticos; consulte siempre las recomendaciones del fabricante.

2. Transferencia de líquidos mediante pipetas serológicas

Las pipetas serológicas vienen en muchos tamaños y opciones: plástico o vidrio, desechables o reutilizables, conectadas o desconectadas. Estos están calibrados para suministrar volúmenes que van desde 0,1 ml hasta 25 ml.

Los tamaños habituales de las pipetas serológicas son 5 ml, 10 ml y 25 ml y deben utilizarse para transferencias de líquidos asépticos de 0,1 ml o más (panel A de Figura 2). También hay pipetas serológicas más grandes que pueden suministrar volúmenes de hasta 100 ml; sin embargo, el enfoque de este protocolo está en las pipetas más comunes y de menor tamaño.

Se necesitan pipetas preesterilizadas con un tapón de algodón para experimentos de microbiología y cultivo de tejidos. No se debe quitar el tapón de la parte superior de la pipeta, ya que está diseñado para funcionar como una barrera contra el llenado excesivo de la pipeta.

Las diferentes aplicaciones requieren pipetas serológicas de plástico o de vidrio. El vidrio es necesario para los disolventes orgánicos. Cualquiera de los dos se puede utilizar al realizar experimentos BSL-1 en la mesa de laboratorio. Solo se puede usar plástico cuando se trabaja en una cabina de bioseguridad con organismos BSL-2 donde no se puede usar un mechero Bunsen. También se recomienda que se utilice plástico para aplicaciones que impliquen la transferencia de agar fundido.

Las pipetas serológicas son de dos tipos: TC ("contener") o TD ("entregar"). Las pipetas TC suministran todo el volumen, incluida la punta, y se deben "soplar" o enjuagar para obtener el volumen especificado. Las pipetas TD están calibradas para dejar un poquito en la punta que debería no sea ​​entregado. Asegúrese de revisar la etiqueta en el cuerpo de la pipeta cerca de la parte superior para determinar de qué tipo es (figura 3). Las más utilizadas son las pipetas TD, que están marcadas con anillos dobles en la parte superior.

Tome una pipeta serológica de plástico estéril (también llamada pipeta de transferencia volumétrica) y retire con cuidado la funda de papel en el extremo con el tapón de algodón despegándola como la piel de un plátano; no retire toda la funda, protegiendo la punta de la pipeta que entrará en contacto con el líquido a transferir. Toque solo la parte superior de la pipeta (por encima de las marcas de graduación) con las manos.

Nunca entre en una solución estéril con una pipeta usada, incluso si se ha tenido mucho cuidado para mantenerla estéril.

Las pipetas serológicas de vidrio se almacenan típicamente en botes de metal (panel B de Figura 2). Afloje la parte superior del recipiente, luego retire con cuidado la tapa y flamee los extremos abiertos de la tapa y el recipiente. Coloque la tapa hacia abajo, de lado, sobre el banco desinfectado. Retire una pipeta del recipiente sosteniéndola horizontalmente y agitándola suavemente para que la parte superior de una o dos pipetas sobresalga aproximadamente una pulgada y se pueda agarrar fácilmente. Deje el recipiente de lado y retire una pipeta, pero tenga cuidado de no tocar las otras pipetas del recipiente. No toque la punta inferior de la pipeta con las manos y evite el contacto de la punta con otras superficies no esterilizadas.

Coloque una ayuda de pipeta, como una pera, una bomba o una pistola en el extremo superior de la pipeta serológica. Retire la funda de papel de la pipeta de plástico. Sostenga la ayuda de la pipeta en su mano derecha.

Si usa una pipeta de vidrio, pase el tercio inferior de la pipeta a través del cono azul en la llama del mechero Bunsen durante 1-3 segundos. Gire la pipeta 180 & # x000b0 a medida que atraviesa la llama. Las pipetas y tubos de plástico no se pueden flamear.

Si es zurdo, sostenga la pipeta con la mano izquierda y realice las manipulaciones posteriores de los frascos y tubos de cultivo con la mano derecha.

La contaminación tiende a ocurrir con las pipetas de plástico cuando se retiran las últimas pulgadas de la pipeta de la manga porque la punta estéril entra en contacto con la parte de la manga que sus manos tocan.

Retire la tapa del frasco que contiene los medios estériles. No coloque la tapa en la mesa de laboratorio, sosténgala entre el dedo anular y la palma de la mano derecha mientras manipula la ayuda de la pipeta con los dedos pulgar, índice y medio de la misma mano (Figura 4). Sosteniendo la botella en un ángulo de 45 & # x000b0, pase el borde de la botella a través de la llama del mechero Bunsen, creando un campo estéril alrededor de la botella abierta.

Aunque es mejor evitarlo, si debe bajar la tapa, colóquela boca abajo sobre una superficie desinfectada. Con una gorra que mira hacia arriba, existe una mayor posibilidad de contaminación por movimientos de objetos o manos, creando corrientes de aire que hacen que los microorganismos y las partículas de polvo desciendan a la superficie interior de la gorra.

El propósito del flameado no es esterilizar, sino calentar la abertura de la botella y crear corrientes de convección de aire hacia arriba y lejos de la abertura (es decir, corriente ascendente). El aire caliente que asciende ayuda a evitar que las partículas de polvo y otros contaminantes entren en la botella.

Mantenga abierto el recipiente estéril durante el menor tiempo posible. Es importante mantener al mínimo los puntos de entrada de microorganismos en el aire durante todo el procedimiento.

Evite toser, estornudar, hablar y otros movimientos involuntarios mientras los recipientes estériles están abiertos.

Nunca pase las manos y los dedos por encima de un campo estéril (es decir, botellas o matraces abiertos, el interior de los tubos y las tapas de las botellas) una vez que hayan pasado a través de la llama del mechero Bunsen.

Trabaje siempre con una llama abierta al abrir tubos o botellas estériles. Nunca tenga más de un tubo, botella o frasco abierto en el banco a la vez. El flameado debe hacerse inmediatamente después de abrir y justo antes de cerrar los tubos, botellas y matraces.

Coloque la punta de la pipeta serológica en el frasco que contiene el medio estéril y luego aspirar, o extraer la muestra asépticamente, de la botella. Utilice la ayuda de la pipeta para controlar el flujo de la muestra en la pipeta. Lea con precisión el volumen aspirado en la pipeta alineando el menisco formado en la parte superior de la columna de líquido con las marcas de graduación de la pipeta calibrada (Figura 5).

¡NO HAGA LA BOCA PIPETA! Utilice siempre una ayuda de pipeta (bomba, pera o pistola).

Preste atención a la secuencia de números al determinar el volumen aspirado. Los números pueden imprimirse de punta a punta, o viceversa, o muchas veces en ambas direcciones.

Al leer el volumen, siempre sostenga la pipeta verticalmente, perpendicular al suelo, y observe el menisco líquido directamente a la altura de los ojos.

Las pipetas serológicas son tan precisas como el incremento marcado más pequeño, que suele ser de 0,1 ml para pipetas de 5 ml y 10 ml y de 0,2 ml para pipetas de 25 ml. Si se necesita una mayor precisión, se puede utilizar una pipeta serológica en combinación con una micropipeta.

Pase el borde de la botella a través de la llama del mechero Bunsen una vez más, luego vuelva a colocar la tapa en la botella. Deje la botella de medio a un lado.

No se queme con el mechero Bunsen a toda prisa por cerrar la botella.

Sostenga un tubo de ensayo o un matraz en su mano izquierda. Retire y sostenga la tapa como se describe en el paso # 4 anterior. Cree un campo estéril quemando el borde del tubo o matraz en el mechero Bunsen.

Dispense el medio de la pipeta en el tubo o matraz. Controle el flujo de la muestra para que no salpique del tubo o matraz.

Los volúmenes se pueden medir de manera que se administre todo el volumen y la pipeta se drene por completo, o se logre un volumen específico realizando una administración de punto a punto (un volumen marcado a otro).

Pase el borde del tubo o matraz a través de la llama del mechero Bunsen una vez más, luego vuelva a colocar la tapa. Deje el tubo o matraz a un lado. Retire la ayuda de la pipeta y deseche la pipeta en el recipiente de desechos adecuado.

Las pipetas serológicas de plástico son desechables, mientras que las pipetas serológicas de vidrio se pueden esterilizar y volver a utilizar. La eliminación adecuada requiere que las pipetas de plástico se coloquen en un recipiente designado para objetos punzantes (caja rígida forrada con una bolsa de plástico para desechar), mientras que las pipetas de vidrio inicialmente deben sumergirse en un recipiente con una solución de lejía al 10% para desinfectar las superficies internas y externas. Luego, las pipetas de vidrio deben lavarse a fondo con detergente de laboratorio, enjuagarse con agua destilada y esterilizarse en un autoclave.

Estos mismos pasos deben seguirse cuando se inoculan medios con un cultivo bacteriano o stock de fagos o cuando se realizan diluciones en serie.

3. Transferencia de líquidos mediante micropipetas

Se pueden medir y dispensar volúmenes diminutos con precisión utilizando micropipetas (también denominadas Panel A de Pipetman de Figura 6). Estos instrumentos vienen en diferentes tamaños, cada uno con un rango de volumen específico: P2 para 0.2-2 & # x003bcl, P10 para 1-10 & # x003bcl, P20 para 2-20 & # x003bcl, P200 para 20-200 & # x003bcl, y P1000 para 200-1000 & # x003bcl.

Trate las micropipetas con cuidado, ya que son instrumentos de precisión. No los deje solos en la mesa del laboratorio, donde pueden caerse y dañarse. No permita que las pipetas entren en contacto con productos químicos corrosivos.

Para volúmenes superiores a 1000 & # x003bcl, utilice una pipeta serológica.

Aunque trabaje dentro del campo estéril creado por el mechero Bunsen, no flamee micropipetas, tubos ni puntas de plástico. Los tubos y las puntas deben esterilizarse previamente. Las micropipetas se pueden limpiar con una toallita desinfectante prehumedecida antes de su uso.

Se puede configurar un volumétrico numérico que muestra el volumen dispensado girando la perilla de ajuste. Ajusta el volumen antes de procediendo al paso # 3.

¡NUNCA GIRE LA PERILLA DE AJUSTE POR ENCIMA DEL RANGO PREVISTO!

Para obtener la máxima precisión al disminuir el ajuste de volumen en la micropipeta, baje lentamente la ruedecilla, asegurándose de no sobrepasar la marca de graduación.

Para obtener la máxima precisión al aumentar el ajuste de volumen en la micropipeta, marque la ruedecilla hacia arriba, pasando la marca de graduación deseada 1/3 de vuelta. Luego, baje lentamente la ruedecilla para alcanzar el volumen deseado, asegurándose de no sobrepasar la marca de graduación.

El volumeter muestra tres números. Dependiendo de la micropipeta, los números se interpretan de manera diferente. Tenga en cuenta que cada micropipeta es tan precisa como la marca de graduación más pequeña.P2: Para volúmenes entre 0.2-2.0 & # x003bcl. El número superior denota volumen en microlitros. El segundo número indica décimas de microlitro (0.1 & # x003bcl), y el tercer número representa centésimas de microlitro (0.01 & # x003bcl). Cada marca de graduación equivale a un incremento de dos milésimas (0,002 & # x003bcl) de un microlitro.P10: Para volúmenes entre 1.0-10.0 & # x003bcl. El número superior es para decenas de microlitros; por lo general, se establece en "0" y solo debe establecerse en "1" con los otros dos números en "0" cuando se dispensa 10.0 & # x003bcl. El número del medio denota volumen en microlitros. El tercer número indica décimas de microlitro (0,1 & # x003bcl). Cada marca de graduación equivale a un incremento de dos centésimas (0.02 & # x003bcl) de un microlitro.P20: Para volúmenes entre 2.0-20.0 & # x003bcl. El número superior en negro es para decenas de microlitros, esto solo debe establecerse en "2" con los otros dos números en "0" al dispensar 20.0 & # x003bcl. El segundo número en negro denota el volumen en microlitros. El tercer número en rojo indica décimas de microlitro (0,1 & # x003bcl). Cada marca de graduación equivale a un incremento de dos centésimas (0.02 & # x003bcl) de un microlitro.P200: Para volúmenes entre 20.0-200 & # x003bcl. El número superior es para cientos de microlitros, esto solo debe establecerse en "2" con los otros dos números en "0" al dispensar 200 & # x003bcl. El número del medio indica el volumen dispensado en decenas de microlitros y el tercer número indica el volumen en microlitros. Cada marca de graduación equivale a un incremento de dos décimas (0.2 & # x003bcl) de un microlitro.P1000: Para volúmenes entre 200-1000 & # x003bcl. El número superior es para miles de microlitros, generalmente se establece en "0" y solo debe establecerse en "1" con los otros dos números en "0" cuando se dispensa 1000 & # x003bcl. El número medio corresponde a cientos de microlitros. El número inferior corresponde a decenas de microlitros. Cada marca de graduación equivale a un incremento de dos (2 & # x003bcl) microlitros.

Comprobación de rendimiento: Estos instrumentos deben calibrarse anualmente, asegurando que la exactitud y la precisión se mantengan dentro del & # x000b1 5% de las especificaciones. Utilice una escala analítica para medir el agua, asegurándose de que los ajustes mínimo y máximo correspondan al volumen previsto. Por ejemplo, use un P1000 para transferir 200 & # x003bcl de agua a un plato de pesaje en la báscula. Dado que el agua tiene una densidad de 1, entonces 1 ml de agua equivale a 1 gramo (g). Por lo tanto, 200 & # x003bcl (0,2 ml) de agua debe ser igual a 0,2 g. Además, asegúrese de que la punta no gotee y pueda mantener el volumen deseado hasta que se dispense usando el sistema de émbolo.

Las micropipetas deben usarse con puntas de plástico desechables en todo momento. Coloque una punta firmemente en el extremo del cilindro de la micropipeta. Presione hacia abajo y gire ligeramente para asegurar un sello hermético.

Las puntas generalmente se empaquetan en cajas de plástico que se pueden esterilizar en autoclave. Abra la caja de la punta para recuperar una punta, luego cierre la caja de la punta para minimizar el contacto con los contaminantes en el aire.

Algunas puntas tienen filtros similares a los tapones de algodón de las pipetas serológicas. Estas puntas suelen ser más caras que las puntas normales y, por lo tanto, se utilizan para aplicaciones especializadas. Por ejemplo, al medir sustancias químicas volátiles como el cloroformo o líquidos radiactivos como el ADN marcado con 32 P, el uso de puntas de filtro ayuda a evitar que el cilindro de la micropipeta se contamine.

Sostenga la micropipeta en posición vertical.

Mantener la micropipeta en posición vertical evitará que los líquidos entren y contaminen el cilindro de la micropipeta.

La micropipeta tiene tres posiciones: (1) Posición de reposo, (2) Primera parada y (3) Segunda parada (Figura 6, panel B). El instrumento tiene un sistema de émbolo de dos paradas. La primera parada tiene dos funciones. La primera es introducir el volumen deseado de líquido en la punta al soltar el émbolo desde el primer tope hasta la posición de reposo. La segunda función es dispensar la mayor parte del líquido de la punta al presionar el émbolo desde la posición de reposo hasta el primer tope. Al presionar más el émbolo hasta el segundo tope, se dispensa cualquier líquido que quede en la punta. Presione el botón del émbolo desde la posición de reposo hasta el primer tope. Se desplazará aire igual al volumen del ajuste.

Sumerja la punta en el líquido mientras mantiene presionado el botón pulsador hasta el primer tope.

No toque la micropipeta con los lados de las botellas, tubos y matraces, de lo contrario, las superficies internas de estos recipientes se contaminarán. Solo las puntas son estériles.

Suelte el botón lentamente para aspirar el líquido en la punta. Deténgase una vez que el botón vuelva a la posición de reposo. Espere un momento para que el líquido entre en la punta.

El volumen de líquido en la punta será igual al volumen del ajuste de la micropipeta.

Los líquidos viscosos, como los que contienen glicerol, requieren más tiempo para entrar en la punta.

Retire la punta del líquido e inspeccione visualmente la punta para confirmar que el líquido extraído ha alcanzado el nivel esperado en la punta y que no hay burbujas de aire en la punta.

Si es necesario, expulse el líquido y apriete manualmente las puntas en la micropipeta. Extraiga el líquido y vuelva a comprobar.

Coloque la punta en ángulo (10 & # x000b0 a 45 & # x000b0) contra la pared del tubo que recibe el líquido. Para expulsar el líquido, presione lentamente el botón del émbolo hasta el primer tope. Espere un momento y luego presione el botón hasta el segundo tope para expulsar cualquier líquido residual en la punta.

Presionar el émbolo demasiado rápido puede hacer que el líquido expulsado salpique o produzca burbujas indeseables en el tubo.

Antes de soltar el émbolo a la posición de reposo, retire la punta del líquido.

Deseche las puntas en el contenedor de desechos de objetos punzantes designado presionando el botón de expulsión de la micropipeta.

4. Limpieza del espacio de trabajo

Cuando termine con un experimento que requiera el uso de una técnica aséptica, apague el mechero Bunsen y luego guarde todos los suministros y reactivos. Limpie las superficies exteriores del material de laboratorio (botellas, micropipetas, cajas de puntas de pipeta) con una toallita desinfectante prehumedecida para asegurarse de que los contaminantes no se transfieran al lugar de almacenamiento.

Coloque la cristalería contaminada y los materiales de desecho peligrosos en el recipiente de eliminación adecuado. Los desechos de laboratorio incluyen material de laboratorio como guantes, pipetas, puntas y tubos. Los desechos peligrosos no infecciosos se generan cuando se realizan experimentos con organismos no patógenos (BSL-1), mientras que los desechos peligrosos infecciosos se generan cuando se utilizan organismos patógenos (BSL-2 o superior). Los desechos infecciosos deben esterilizarse en autoclave o desinfectarse antes de desecharse. Siga las pautas de seguridad del laboratorio descritas en BMBL (5ª Ed.), Así como las proporcionadas por OSHA y los departamentos institucionales de salud y seguridad ambiental.

Limpie toda el área de trabajo en la mesa del laboratorio con una toallita desinfectante prehumedecida del recipiente, permitiendo nuevamente que el desinfectante se evapore.

Lávese bien las manos con jabón antiséptico y agua tibia antes de salir del laboratorio.

5. Resultados representativos

Una aplicación de muestra para el uso de pipetas serológicas para transferir líquidos se muestra en Figura 7. Estas pipetas se utilizan a menudo en el laboratorio de microbiología para preparar medios para la inoculación con cultivos bacterianos. Por ejemplo, los matraces estériles primero se llenan con un volumen específico de caldo de cultivo, en este caso Caldo Luria (LB), luego una pequeña cantidad de células (como E. coli) se agregan a los medios. Usando una pipeta serológica, primero el caldo debe transferirse asépticamente desde la botella de medio al matraz. En este caso, se añadieron 25 ml de LB a un matraz estéril de 125 ml utilizando una pipeta serológica de 25 ml. A continuación, se debe inocular el caldo con E. coli células. Aquí, se transfirieron 10 & # x003bcl de células asépticamente usando una micropipeta P20 desde un matraz de cultivo en crecimiento previo a los 25 ml de LB fresco. El matraz se incuba en una cámara de crecimiento durante un período de tiempo particular, lo que permite que las células se repliquen (para este ejemplo, la E. coli las células se incubaron durante la noche a 37 ° C en una plataforma de agitación). El resultado es un cultivo celular bacteriano turbio que se puede utilizar para experimentos posteriores.

Las pipetas serológicas también se pueden usar para transferir medios originalmente suministrados en una botella a tubos de ensayo, o entre tubos de ensayo, como se hace al hacer diluciones de un cultivo bacteriano. Si no se mantiene la técnica aséptica durante este tipo de manipulaciones de los medios, los cultivos se contaminarán y los experimentos posteriores que utilicen esos cultivos se retrasarán porque será necesario preparar cultivos frescos no contaminados. Los errores ocurren porque no se mantiene un campo estéril durante todo el procedimiento. Por ejemplo, puede olvidarse de desinfectar la mesa de laboratorio o flamear el borde de una botella o tubo de cultivo. Puede tocar la punta de la pipeta o colocar la tapa de una botella o tubo de ensayo en el banco en lugar de sostenerlo en la mano. El procedimiento adecuado es fundamental para mantener al mínimo la contaminación de los medios y cultivos. Figura 8A proporciona un ejemplo de un cultivo puro versus contaminado de E. coli en un tubo que contiene 5 ml de LB. El panel de la izquierda muestra un cultivo que muestra una turbidez fina uniforme típica de un E. coli cultura. Por el contrario, el panel de la derecha muestra un cultivo contaminado en el que las características de crecimiento se desvían de las esperadas para esta cepa bacteriana.

Pueden producirse errores técnicos al manipular pipetas serológicas que provoquen la transferencia de volúmenes incorrectos de medios entre los tubos de ensayo. Por ejemplo, puede leer el volumen de la pipeta de forma incorrecta (es decir, la parte superior frente a la inferior del menisco) o puede expulsar el medio por completo de una pipeta TD, que fue diseñada para dejar una pequeña parte en la punta que no se administrará. Al realizar una entrega de papel punto a punto, puede usar las marcas de calibración incorrectas y dispensar el volumen incorrecto. Figura 8B muestra un ejemplo de tubos de ensayo con volúmenes de medio correctos versus incorrectos. El tubo de la izquierda contiene 3,5 ml de LB medido con una pipeta serológica de 5 ml. El estudiante realizó una entrega punto a punto del medio en el que se dibujó LB hasta la marca de graduación de 5,0 ml y se dispensó hasta la marca de 1,5 ml. El tubo de la derecha contiene 2,5 ml de LB medido con una pipeta del mismo tamaño porque el estudiante que realizó la entrega punto a punto de los medios lo dispensó incorrectamente desde la marca de 5,0 ml hasta la marca de 2,5 ml. Este error dará como resultado un cultivo bacteriano que estará en una concentración más alta que la planificada, lo que provocará que las diluciones posteriores sean incorrectas. Esta propagación de errores puede resultar en un experimento fallido que debería repetirse con las concentraciones de células correctas.

Una aplicación de muestra para el uso de micropipetas para transferir líquidos se muestra en Figura 9. Estas pipetas se utilizan para una variedad de experimentos en biología molecular y microbiología, incluida la preparación de muestras para PCR y electroforesis en gel o la inoculación de medios o tampones estériles con pequeños volúmenes (menos de 1,0 ml) de células bacterianas o partículas de fagos. En el ejemplo proporcionado, el estudiante transfirió 12.5 & # x003bcl de tampón TE a un tubo de microcentrífuga de 1.8 ml (el tubo de la izquierda en el panel A observe que se ha agregado colorante al tampón para facilitar la visualización del líquido dentro de los tubos transparentes de microcentrífuga). Este procedimiento requería que el estudiante primero seleccionara la micropipeta correcta, en este caso una P20, y luego configurara el volumétrico al volumen correcto (panel B). Se utilizó una punta que contiene un tapón de algodón en el extremo para evitar que la posible contaminación que podría ser expulsada del cilindro de la micropipeta llegue a la muestra de tampón en la punta. Esta precaución no es necesaria si se tiene cuidado al aspirar líquidos en las puntas, presionando el émbolo lentamente para que el líquido no salpique en el cilindro de la pipeta. Pueden ocurrir errores técnicos que resulten en la transferencia de volúmenes incorrectos. Por ejemplo, puede seleccionar la micropipeta incorrecta para el trabajo o configurar el volumétrico de la micropipeta correcta en un volumen incorrecto. Antes de sumergir la punta en el amortiguador, puede empujar el émbolo más allá del primer tope, provocando que un exceso de amortiguador se introduzca en la punta al soltar el émbolo. Alternativamente, es posible que no sumerja la punta lo suficiente en el amortiguador, por lo que se aspira aire en la punta en lugar del pulidor. Es posible que olvide empujar el émbolo hasta el segundo tope al dispensar tampón en el tubo de microcentrífuga, lo que hace que se libere menos del volumen deseado de la punta. El tubo derecho en el panel A de Figura 9 muestra un tubo de microcentrífuga que contiene el volumen incorrecto de tampón en relación con el tubo de la izquierda. En lugar de dispensar 12.5 & # x003bcl de tampón, el estudiante dispensaba 125 & # x003bcl. En este caso, aunque los números están configurados de forma idéntica en el volumétrico, se seleccionó la micropipeta incorrecta para el trabajo (el estudiante usó un panel B P200 en lugar de un P20), lo que resultó en la entrega de un volumen sustancialmente mayor de búfer. Si esta solución se estaba utilizando para preparar una mezcla de reactivos para una aplicación como la PCR, este error cambiará la concentración final de todos los reactivos que se agreguen posteriormente al mismo tubo. En consecuencia, es poco probable que el experimento tenga éxito, ya que los procedimientos de biología molecular como la PCR requieren que todos los componentes estén en concentraciones específicas para que la reacción funcione correctamente.

Debido a que no siempre es factible garantizar que las micropipetas (especialmente el interior del barril) sean estériles, las soluciones madre pueden contaminarse y provocar que incluso los esfuerzos de resolución de problemas fallen al realizar experimentos. Si se utilizan micropipetas para transferir soluciones estériles, se recomienda encarecidamente que se preparen alícuotas de las soluciones madre (medio, tampón, agua) utilizando una técnica aséptica con pipetas serológicas. Es común mantener las soluciones madre de trabajo en tubos cónicos estériles de 15 ml o 50 ml. A menudo, estos son más fáciles de manipular mientras se opera una micropipeta y se pueden reemplazar con una alícuota nueva de la solución madre si se contaminan durante las transferencias de volumen.

Figura 1. Campo estéril creado por la corriente ascendente de la llama del mechero Bunsen. Para minimizar la contaminación de las soluciones y cultivos estériles, es fundamental que todas las manipulaciones se realicen dentro del campo estéril. Los bordes de los tubos y matraces de cultivo de vidrio deben pasarse por la punta del cono azul, la parte más caliente de la llama. Los tubos y puntas de plástico no se pueden flamear; estos deben esterilizarse previamente con métodos alternativos antes de su uso.

Figura 2. Pipetas serológicas utilizadas para la transferencia aséptica de líquidos. (A) Se muestran de izquierda a derecha dibujos de pipetas de 25 ml, 10 ml y 5 ml.(B) Las pipetas serológicas pueden ser de plástico o de vidrio. Las pipetas de plástico son desechables (de un solo uso) y normalmente se envuelven individualmente en papel y fundas de plástico en las que todas las superficies internas son estériles (lado izquierdo). Las pipetas de vidrio se pueden usar varias veces, siempre que se limpien y esterilicen entre usos; por lo general, se almacenan en botes de metal (lado derecho).

Figura 3. Las pipetas serológicas son de dos tipos: TC ("contener") o TD ("entregar"). Se muestra la etiqueta explicativa de una pipeta TD de 5 ml.

Figura 4. Técnica aséptica. Cuando aspire líquidos de una botella, matraz o tubo con tapones, nunca coloque el tapón en la mesa. En su lugar, sostenga la tapa con la misma mano que la ayuda de la pipeta mientras manipula el recipiente que contiene el líquido con la mano opuesta como se muestra.

Figura 5. El menisco se forma al introducir líquido en una pipeta serológica. El volumen corresponde a la marca de graduación de la pipeta donde se alinea la parte inferior del menisco. En este ejemplo, el menisco se alinea con la marca de graduación de 2,5 ml.

Figura 6. Micropipeta monocanal. (A) Se muestra una micropipeta de muestra con una punta de plástico unida a la parte inferior del soporte de la punta del cilindro. Se indican las ubicaciones del volumétrico, la ruedecilla para cambiar la configuración del volumétrico, el soporte de la punta del barril, el botón de expulsión de la punta y el botón pulsador del émbolo. (B) Sistema de émbolo de dos paradas en una micropipeta.

Figura 7. Utilizando pipetas serológicas para transferir los medios a matraces estériles de 125 ml. El matraz de la izquierda tiene 25 ml de medio solamente (LB), mientras que el matraz de la derecha es un cultivo de E. coli resultante de inocular LB con células y luego incubar durante la noche a 37 ° C. Observe cómo el medio en el matraz de la derecha es turbio debido al crecimiento celular.

Figura 8. Usar pipetas serológicas para transferir medios a tubos de ensayo estériles. (A) El tubo de la izquierda contiene 5 ml de un puro E. coli cultivo, mientras que el tubo de la derecha contiene 5 ml de un cultivo de células bacterianas contaminadas. Tenga en cuenta las diferencias en las características de crecimiento entre las dos culturas. Aunque ambos son turbios, el cultivo de la derecha ha sido contaminado con un hongo u otros microorganismos en el aire, lo que le da al cultivo un color y consistencia diferente al esperado para E. coli células. (B) El tubo de cultivo de la izquierda contiene 3,5 ml de LB, mientras que el tubo de la derecha contiene solo 2,5 ml de LB. Esta diferencia de volumen se debió a un error cometido al realizar una entrega de medio punto a punto a los tubos.

Figura 9. Uso de micropipetas para transferir tampón a tubos de microcentrífuga estériles. (A) El tubo de microcentrífuga izquierdo contiene solo 12,5 & # x003bcl de tampón TE, mientras que el tubo derecho contiene 125 & # x003bcl. Tenga en cuenta que se ha agregado un tinte al tampón para facilitar la visualización del líquido dentro de los tubos transparentes de microcentrífuga. (B) El volumétrico izquierdo es de una micropipeta P20, mientras que el volumétrico derecho es de una micropipeta P200. Un error común es seleccionar la micropipeta incorrecta. Aunque los números se establecen de manera idéntica en el volumétrico P20 y P200, la selección de la micropipeta incorrecta da como resultado la transferencia de volúmenes incorrectos.

Figura 10. Campana de flujo laminar utilizada para prevenir la contaminación de soluciones y cultivos. Se muestra una cabina de bioseguridad aprobada para trabajar con organismos BSL-2.


Biología

BIOL 1300 Body Systems with Lab (3 horas crédito semestrales) Examina los sistemas de órganos de los mamíferos, principalmente los humanos. Se enfatiza la función en relación con la estructura. Se enfatizan los efectos de un sistema de órganos sobre otros. El objetivo general del curso es una apreciación de la integración y el control de todos los sistemas. Hay un laboratorio de anatomía humana basado en modelos. Este curso está diseñado específicamente para no especializaciones. (2-2) S

BIOL 1318 (BIOL 2316) Genética humana (3 horas crédito semestrales) Curso elemental sobre los fundamentos de la genética humana. Los temas incluyen patrones de herencia, estructura del ADN y replicación, función genética, mutación y su papel en enfermedades genéticas, cáncer y el sistema inmunológico, cuestiones de evolución sexual, ingeniería genética y terapia génica, forense y bioética. Este curso está diseñado específicamente para no especializaciones. (3-0) Y

BIOL 1350 Body Systems (3 horas crédito semestrales) Examina los sistemas de órganos de los mamíferos, predominantemente los humanos. Se enfatiza la función en relación con la estructura. Se enfatizan los efectos de un sistema de órganos sobre otros. El objetivo general del curso es una apreciación de la integración y el control de todos los sistemas. Este curso está diseñado específicamente para no especializaciones. (3-0) R

BIOL 1V00 Temas en Ciencias Biológicas (1-6 horas crédito semestrales) Se pueden repetir para obtener crédito ya que los temas varían (máximo 6 horas crédito semestrales). ([1-6] -0) R

BIOL 1V01 Temas en Ciencias Biológicas con Laboratorio (1-6 horas crédito semestrales) Pueden repetirse a medida que los temas varían (máximo 6 horas crédito semestrales). ([1-5] - [1-5]) R

BIOL 1V95 Instrucción individual en biología (1-6 horas crédito semestrales) Estudio individual bajo la dirección de un miembro de la facultad. Puede repetirse para obtener crédito ya que los temas varían (6 horas de crédito semestrales como máximo). Se requiere el consentimiento del instructor. ([1-6] -0) S

BIOL 2111 Taller de Introducción a la Biología Moderna I (1 hora crédito semestral) Resolución de problemas y discusión relacionados con el tema en BIOL 2311. Requisitos previos: ((CHEM 1311 o CHEM 1315 o equivalente) y (CHEM 1312 o CHEM 1316)) o CHEM 1301. Co-requisito: BIOL 2311. (1-0) S

BIOL 2112 Taller II de Introducción a la Biología Moderna (1 hora crédito semestral) Resolución de problemas y discusión relacionados con el tema en BIOL 2312. Co-requisito: BIOL 2312. (1-0) S

BIOL 2281 Laboratorio de introducción a la biología (2 horas crédito semestrales) Las conferencias introductorias discuten los aspectos teóricos e históricos de los experimentos llevados a cabo en el laboratorio. Los experimentos de laboratorio introducen al estudiante a la bioinformática, la biología celular básica y la estructura y función de las proteínas y los ácidos nucleicos. Los ejercicios informáticos en bioinformática implican múltiples análisis de alineación, BLAST y búsquedas bibliográficas, y la construcción de árboles filogenéticos. Los experimentos de laboratorio incluyen microscopía, técnicas microbianas, genética de levaduras y el comportamiento electroforético de proteínas normales y mutantes. Los experimentos relacionados con el ADN incluyen aislamiento (nuclear y ADNmt), amplificación, digestiones de restricción, electroforesis, mapeo de plásmidos y transformaciones. Los estudiantes presentan carteles de sus investigaciones a largo plazo al final del semestre. Requisito previo: BIOL 2311 (consulte también los requisitos previos para BIOL 2311). ([0-1] - [1-2]) S

BIOL 2311 (BIOL 1306) Introducción a la Biología Moderna I (3 horas crédito semestrales) Presentación de algunos de los conceptos fundamentales de la biología moderna, con énfasis en la base molecular y celular de los fenómenos biológicos. Los temas incluyen la química y el metabolismo de moléculas biológicas, genética clásica y molecular elemental, y aspectos seleccionados de la biología del desarrollo, fisiología (incluida la acción hormonal), inmunidad y neurofisiología. Requisitos previos: ((CHEM 1311 o CHEM 1315) y (CHEM 1312 o CHEM 1316)) o CHEM 1301. Co-requisito: BIOL 2111. (3-0) S

BIOL 2312 (BIOL 1307) Introducción a la biología moderna II (3 horas crédito semestrales) El énfasis general estará en la fisiología de los órganos y los mecanismos reguladores que involucran órganos y sistemas de órganos individuales. Los factores considerados serán el desarrollo y la estructura de los órganos, los procesos evolutivos y la diversidad biológica, y sus efectos sobre los mecanismos fisiológicos que regulan el medio interno. Co-requisito: BIOL 2112. (3-0) S

BIOL 2350 Bases biológicas de la salud y la enfermedad (3 horas crédito semestrales) Fundamentos de la fisiopatología, centrándose en los procesos dinámicos que causan enfermedades, dan lugar a síntomas y señalan el intento del cuerpo por superar la enfermedad. El curso cubre enfermedades que pueden afectar dramáticamente la vida de un individuo y la sociedad en la era moderna. Los temas incluyen 1) mecanismos de enfermedades infecciosas, inmunidad e inflamación y 2) alteraciones en la estructura y función de los sistemas reproductivo, circulatorio, respiratorio y urinario. Se hace especial hincapié en los aspectos preventivos de cada enfermedad sobre la base de enfoques no farmacológicos que promueven el bienestar. Este curso está diseñado como una asignatura de ciencias abierta a todas las especialidades. (3-0) S

BIOL 2V00 Temas en Ciencias Biológicas (1 a 6 horas crédito semestrales) Se pueden repetir ya que los temas varían (6 horas crédito semestrales como máximo). Se requiere el consentimiento del instructor. ([1-6] -0) R

BIOL 2V01 Temas en Ciencias Biológicas con Laboratorio (1-6 horas crédito semestrales) Se pueden repetir a medida que los temas varían (máximo 6 horas crédito semestrales). ([1-5] - [1-5]) R

BIOL 2V95 Instrucción individual en biología (1-6 horas crédito semestrales) Estudio individual bajo la dirección de un miembro de la facultad. Puede repetirse para obtener crédito ya que los temas varían (6 horas de crédito semestrales como máximo). Se requiere el consentimiento del instructor. ([1-6] -0) S

BIOL 3101 Taller de Genética Clásica y Molecular (1 hora crédito semestral) Resolución de problemas y discusión relacionados con la materia en BIOL 3301. Prerrequisitos: BIOL 2311 y (BIOL 2281 o CHEM 2401 o equivalente) y (CHEM 2323 o equivalente). Co-requisito: BIOL 3301. (1-0) S

BIOL 3102 Taller de Biología Molecular y Celular Eucariota (1 hora crédito semestral) Resolución de problemas y discusión relacionados con el tema en BIOL 3302. Requisitos previos: BIOL 3301 y (BIOL 3361 o CHEM 3361) o equivalente. Co-requisito: BIOL 3302. (1-0) S

BIOL 3161 Taller de bioquímica I (1 hora crédito semestral) Metodología de resolución de problemas en bioquímica discusión de avances recientes en áreas relacionadas con la materia en BIOL 3361 o CHEM 3361. Prerrequisitos: (CHEM 2323 o equivalente) y CHEM 2325. Co-requisito: BIOL 3361 o CHEM 3361. (1-0) S

BIOL 3162 Taller de bioquímica II (1 hora crédito semestral) Metodología de resolución de problemas en bioquímica discusión de avances recientes en áreas relacionadas con el tema en BIOL 3362 o CHEM 3362. Requisito previo: BIOL 3361 o CHEM 3361 o equivalente, o se requiere consentimiento del instructor. Co-requisito: BIOL 3362 o CHEM 3362. (1-0) Y

BIOL 3301 Genética clásica y molecular (3 horas crédito semestrales) El fenómeno de la herencia, su base citológica y molecular, la expresión génica y la transferencia de información genética, con especial atención a los sistemas bacterianos y eucariotas modelo, recombinación genética y mapeo de cromosomas, análisis de tétradas, mutaciones y mutagénesis genética interacciones aplicación de técnicas de ADN recombinante al análisis genético. Requisitos previos: BIOL 2311 y (BIOL 2281 o CHEM 2401 o equivalente) y (CHEM 2323 o equivalente). Co-requisito: BIOL 3101. (3-0) S

BIOL 3302 Biología Molecular y Celular Eucariota (3 horas crédito semestrales) Organización estructural de células eucariotas Regulación de las actividades celulares membranas y transporte de replicación celular Ejemplos de especialización celular como la sangre (inmunoglobulinas) y las células musculares. Requisitos previos: BIOL 3301 y (BIOL 3361 o CHEM 3361) o equivalente. Co-requisito: BIOL 3102. (3-0) S

BIOL 3303 Introducción a la microbiología (3 horas crédito semestrales) Los microbios contribuyen a los principales procesos biogeoquímicos, viven en entornos inhóspitos para otros organismos y pueden constituir la mayor parte de la biomasa de la Tierra. Forman simbiosis beneficiosas con organismos multicelulares y desempeñan un papel fundamental en el desarrollo de esos organismos. En contraste con estos roles beneficiosos, ciertos microbios son preocupaciones de salud pública global. Este curso examina la forma y función del mundo microbiano. Requisitos previos: (BIOL 2281 o equivalente) y BIOL 2311 y BIOL 2312. (3-0) S

BIOL 3305 Análisis evolutivo (3 horas crédito semestrales) Evidencia molecular y fósil de la evolución. Selección natural darwiniana, mecanismos de evolución, genética mendeliana en poblaciones, formas de adaptación, árboles evolutivos, filogenia molecular, teorías sobre el origen de la vida. Requisito previo: BIOL 3301. (3-0) Y

BIOL 3312 Introducción a la programación para ciencias biológicas (3 horas crédito semestrales) Este curso es una introducción a las prácticas de programación que utilizan C ++ diseñado específicamente para estudiantes de ciencias biológicas. Se pondrá especial énfasis en características particulares de C ++ como la programación orientada a objetos, algunas estructuras de datos así como aplicaciones para procesar, modelar y analizar datos biológicos. Uno de los objetivos de este curso es proporcionar una sólida formación en habilidades de programación en un nivel básico, dejando las técnicas más avanzadas de desarrollo de software y algoritmos para otros cursos avanzados. Este curso también cubre una introducción al análisis de datos con R, una plataforma estadística ampliamente utilizada en la comunidad de las ciencias biológicas. Requisitos previos: (BIOL 2281 o equivalente) y BIOL 2311 y BIOL 2312. (3-0) Y

BIOL 3315 Epigenética (3 horas crédito semestrales) Casi todos los tipos de células de nuestro cuerpo comparten la misma información genética, pero realizan funciones muy diferentes. Por ejemplo, nuestras células nerviosas son morfológica y funcionalmente distintas de nuestras células musculares. ¿Cómo puede un mismo genoma dar lugar a cientos de tipos de células distintos en nuestro cuerpo? ¿Cómo pueden las diferentes enfermedades afectar a los gemelos idénticos que comparten la misma información genética? ¿Por qué la dieta y la salud de nuestros padres y abuelos pueden tener influencias duraderas en nuestra propia salud? El campo de la epigenética surgió en las últimas décadas para abordar estas cuestiones fundamentales que cruzan nuestro genoma, desarrollo, medio ambiente y enfermedad. Este curso proporcionará una visión general amplia de los fenómenos epigenéticos y los mecanismos epigenéticos con conferencias semanales y discusiones en grupos pequeños sobre la literatura primaria. El curso introducirá a los estudiantes a trabajos fundamentales en epigenética y desarrollos recientes con el objetivo de inculcar un conocimiento crítico del campo. Requisitos previos: (BIOL 3101 y BIOL 3301) o equivalente o se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) Y

BIOL 3318 Biología Forense (3 horas crédito semestrales) Papel y metodología de las pruebas biológicas en la investigación criminal y la ciencia forense. Análisis de los procedimientos y metodologías empleados en la recolección, preservación y cribado de evidencia biológica y pruebas de proteínas y ADN. Se cubre la genética de poblaciones empleada durante la evaluación estadística de datos. El curso está estructurado para permitir la participación de personas con y sin formación biológica. El tema se desarrollará a partir del concepto de "¿Qué es el ADN?" a través de "¿Qué significa realmente una estimación estadística?" (3-0) T

BIOL 3320 Genética aplicada (3 horas crédito semestrales) Los organismos modelo genéticos como el gusano plano (Planaria), la mosca de la fruta (Drosophila melanogaster), el nematodo (Caenorhabditis elegans) y el pez cebra (Danio rerio) son las piedras angulares de la investigación biomédica. Estos organismos conocidos por su simplicidad de estructura y similitud genética con los humanos han sido fundamentales en el avance de nuestra comprensión de muchos procesos biológicos y enfermedades humanas. En este curso basado en la investigación, los alumnos aplicarán los principios básicos de los sistemas de modelos genéticos, la genética de transmisión y la genética molecular para investigar conceptos biológicos importantes como la división de células embrionarias, las células madre y la regeneración, la herencia mendeliana, las mutaciones genéticas y los fenotipos. A lo largo de este curso exploratorio, los estudiantes obtendrán experiencia práctica en la realización de cultivos básicos, manipulación genética y análisis fenotípicos necesarios para utilizar organismos modelo genéticos en su investigación. Los alumnos participarán en debates y actividades en clase para establecer conexiones entre los conceptos aprendidos en clase y sus aplicaciones en tiempo real en las ciencias biomédicas. Requisitos previos: BIOL 2281 o equivalente y (BIOL 2311 y (BIOL 2111 o equivalente)) y (BIOL 2312 y (BIOL 2112 o equivalente)). (3-0) S

BIOL 3335 Fisiología microbiana (3 horas crédito semestrales) Procesos de vida de los microbios: fermentaciones, asimilación de N2 y otras vías bioquímicas específicas de la estructura y diferenciación celular de las bacterias, entre otras. Sustitutos de BIOL 3362 o CHEM 3362 para las carreras de Biología. Requisitos previos: BIOL 2311 y (BIOL 3361 o CHEM 3361). (3-0) T

BIOL 3336 Estructura de proteínas y ácidos nucleicos (3 horas crédito semestrales) Examina los diferentes tipos de motivos de proteínas, el plegamiento y la estabilidad de proteínas y ADN, y la relación entre la estructura y la función. Se presentan dicroísmo circular, RMN y métodos cristalográficos de determinación estructural. Los tipos de proteínas consideradas incluyen factores de transcripción, proteinasas, proteínas de membrana, proteínas en la transducción de señales, proteínas del sistema inmunológico y proteínas diseñadas. Los estudiantes también reciben instrucción en la visualización y manipulación de estructuras de proteínas y ADN utilizando varios programas de modelado y datos de sitios web nacionales. Requisito previo: BIOL 3361 o CHEM 3361. (3-0) T

BIOL 3351 Biología celular médica (3 horas crédito semestrales) Explora temas de biología celular y medicina. Los temas incluyen la organización celular, la estructura y la herencia del ADN, la terapia génica, las células madre, la medicina regenerativa, la señalización de célula a célula, el funcionamiento de diferentes tipos de células y tejidos, incluidos los del sistema inmunológico y endocrino, y el estudio de varios factores genéticos. enfermedades, como el cáncer y las enfermedades cardiovasculares. Requisitos previos: BIOL 2311 y BIOL 2312 o equivalente. (3-0) S

BIOL 3355 Fisiopatología clínica (3 horas crédito semestrales) El enfoque de este curso es satisfacer los intereses de los estudiantes que planean convertirse en profesionales que trabajan en el campo de la atención médica. El objetivo estratégico del curso es que los estudiantes interioricen la noción de la complejidad de los procesos que conducen al inicio y al desarrollo (patogénesis) de una enfermedad, para enfatizar el concepto de regulación homeostática desequilibrada subyacente a cualquier patología. Comprender la idea de la participación de todos los sistemas corporales en las manifestaciones aparentemente "locales" de una enfermedad y comprender la importancia de las conexiones cuerpo-mente en las características subjetivas y objetivas de una enfermedad individual y su influencia en el proceso de sanogenesis (recuperación). Incorporaremos los datos científicos más recientes en los fundamentos de la fisiopatología y discutiremos los problemas tipológicos clásicos como la etiología, el diagnóstico, las características clínicas, el tratamiento y el pronóstico de la condición. Las condiciones patológicas que se cubrirán en este curso incluyen las enfermedades infecciosas y algunos trastornos inmunológicos, las enfermedades de los sistemas reproductivo, cardiovascular, respiratorio y urinario. Requisitos previos: BIOL 2281 y BIOL 2312. ([1-3] -0) S

BIOL 3357 Fisiología de mamíferos con laboratorio (3 horas crédito semestrales) Este curso se centrará en los sistemas del cuerpo humano y las vías fisiológicas relacionadas con las funciones y el control del sistema de órganos, que incluyen, entre otros, el control y la retroalimentación del sistema nervioso central, cardiovascular, respiratorio y neuromuscular. fisiología, así como temas como la regulación de la presión arterial y la fisiología del ejercicio. Este curso utilizará software de computadora e instrumentación electrónica para realizar electrocardiografía, electromiografía, electroencefalografía, pletismografía, análisis de función pulmonar, análisis de polígrafo y biorretroalimentación. Se requiere el consentimiento del instructor. Requisitos previos: BIOL 3455 o equivalente y BIOL 3456 o equivalente. (3-1) S

BIOL 3361 Bioquímica I (3 horas crédito semestral) Estructuras y propiedades químicas de aminoácidos purificación y caracterización de proteínas estructura de proteínas y termodinámica del plegamiento de la cadena polipeptídica mecanismos catalíticos, cinética y regulación de enzimas energética de reacciones bioquímicas generación y almacenamiento de energía metabólica asociada con carbohidratos fosforilación oxidativa y mecanismos de transporte de electrones fotosíntesis. Requisitos previos: CHEM 2323 (o equivalente) y CHEM 2325 (o equivalente). Co-requisito: BIOL 3161. (Igual que CHEM 3361) (3-0) S

BIOL 3362 Bioquímica II (3 horas crédito semestral) Desglose y síntesis de la estructura y función de la membrana de los lípidos metabolismo del nitrógeno y fijación del metabolismo de los nucleótidos estructura y propiedades de los ácidos nucleicos secuenciación e ingeniería genética replicación, transcripción y traducción estructura cromosómica acción hormonal base bioquímica de ciertas patologías Procesos. Requisito previo: (BIOL 3361 o CHEM 3361) o su equivalente, o se requiere el consentimiento del instructor. Co-requisito: BIOL 3162. (Igual que CHEM 3362) (3-0) S

BIOL 3370 Fisiología del ejercicio (3 horas crédito semestrales) Examina el funcionamiento y la adaptación de los sistemas de órganos humanos (cardiovascular, respiratorio, renal, esquelético y hormonal) durante el ejercicio. También se discuten los aspectos clínicos del ejercicio, incluidos los efectos del entrenamiento, la nutrición, el rendimiento y las ayudas ergogénicas. Requisitos previos: BIOL 2312 y (BIOL 3455 o BIOL 3456 o equivalente). (3-0) Y

BIOL 3380 Laboratorio de bioquímica (3 horas crédito semestrales) Técnicas actuales en la purificación y caracterización de enzimas para demostrar los principios fundamentales que se utilizan en los laboratorios modernos de investigación de bioquímica y biología molecular. Las habilidades prácticas que se enseñan incluyen micropipeta, preparación de solución básica, realización de mediciones de pH, aislamiento de extractos de enzimas crudas y realización de ensayos de actividad estándar. Los experimentos avanzados con proteína fluorescente verde y lactato deshidrogenasa incluyen cromatografía de afinidad Ni ++ - NTA, cromatografía iónica, detección de proteínas mediante Bradford, Lowry y ensayos espectrofotométricos, separación SDS-PAGE, análisis Western Blot y cinética enzimática. Requisito previo: BIOL 2281 o CHEM 2401 o equivalente. Prerrequisito o Correquisito: BIOL 3361 o CHEM 3361. (1-4) S

BIOL 3385 Histología médica (3 horas crédito semestrales) La histología médica cubrirá la estructura microscópica y la función de las células y tejidos humanos que componen los sistemas de órganos en condiciones normales y patológicas. El componente de la conferencia incluirá la comprensión de las enfermedades relevantes y las condiciones fisiopatológicas desde un punto de vista histológico. El componente de laboratorio de este curso incluirá el estudio microscópico de células y tejidos usando el microscopio óptico compuesto y preparaciones preparadas. Los estudios de laboratorio complementarán y correlacionarán con el estudio de la organización de células y tejidos. Requisitos previos: BIOL 2311 y BIOL 2312. (1.5-3) S

BIOL 3388 Biología de las abejas melíferas (3 horas crédito semestrales) Este curso de encuesta explora la biología de las abejas melíferas a nivel de colonias, organismos y moléculas. Los temas incluyen anatomía de las abejas melíferas, arquitectura de nidos, desarrollo de castas y organización social, reproducción y diversidad genética, feromonas y comunicación, comportamiento de búsqueda de alimento, reproducción de colonias, manejo de plagas y enfermedades, y apicultura básica. Se puede proporcionar experiencia práctica opcional. Requisitos previos: (BIOL 2281 o CHEM 2401 o equivalente) y BIOL 2311 y BIOL 2312. (3-0) Y

BIOL 3455 Anatomía y fisiología humana con laboratorio I (4 horas crédito semestrales) Primero de una secuencia de dos cursos que proporciona un estudio integral de los principios básicos de la fisiología humana junto con un laboratorio de anatomía humana detallado y basado en modelos y fisiología asistida por computadora experimentos. El examen de las relaciones estructura-función incluye un estudio de la histología humana y los sistemas de órganos esqueléticos, musculares, neurales y sensoriales. Requisito previo: BIOL 2312 o equivalente. (3-3) S

BIOL 3456 Anatomía y fisiología humana con Lab II (4 horas crédito semestrales) Continuación del estudio integral de los principios básicos de la fisiología humana junto con un laboratorio detallado de anatomía humana basado en modelos y experimentos de fisiología asistida por computadora. Se examinan los sistemas endocrino, cardiovascular, respiratorio, digestivo, renal y reproductivo. Requisito previo: BIOL 3455 o equivalente. (3-3) S

BIOL 3520 Microbiología general con laboratorio (5 horas crédito semestrales) Curso de especialización en microbiología general. Las conferencias incluyen temas recomendados por la División de Educación de la Sociedad Estadounidense de Microbiología: estructura microbiana, diversidad, crecimiento y control del crecimiento, metabolismo, genética y regulación genética. Entre los temas adicionales cubiertos se encuentran la virología, la inmunología y las enfermedades microbianas (plantas y animales), incluida la epidemiología, la transmisión y las interacciones huésped-microbio. El laboratorio se enfoca en el desarrollo de habilidades de laboratorio en microbiología clásica por parte del estudiante individual. Los ejercicios incluyen varias técnicas de tinción y cultivo puro, pruebas bioquímicas y otras pruebas in vitro, así como el aislamiento y la identificación de organismos desconocidos. Requisitos previos: (BIOL 2281 o CHEM 2401 o equivalente) y (BIOL 2311 y BIOL 2312) o equivalente y CHEM 2323. (2-3) Y

BIOL 3V00 Temas en Ciencias Biológicas (1-6 horas crédito semestrales) Pueden repetirse a medida que los temas varían (9 horas crédito semestrales como máximo). Requisitos previos: (BIOL 2281 o CHEM 2401 o equivalente) y BIOL 2311 y BIOL 2312 o equivalente. ([1-6] -0) S

BIOL 3V01 Temas en Ciencias Biológicas con Laboratorio (1-6 horas crédito semestrales) Se pueden repetir a medida que los temas varían (máximo 6 horas crédito semestrales). Requisitos previos: (BIOL 2281 o CHEM 2401 o equivalente) y BIOL 2311 y BIOL 2312 o equivalente. ([1-5] - [1-5]) R

Práctica de investigación BIOL 3V15 para UT-PACT (1-6 horas crédito semestrales) Los estudiantes en el programa UT-PACT participan en proyectos de investigación clínica o biomédica bajo la supervisión conjunta de la facultad de UT Southwestern y el coordinador del programa UT-PACT de UT Dallas. Los estudiantes reciben capacitación en metodología de investigación relevante y ética de la investigación antes de ser colocados en entornos clínicos. Consulte con el coordinador del programa UT-PACT antes de la inscripción para obtener información sobre los requisitos previos y las horas mínimas en el lugar. Puede repetirse para obtener crédito. (9 horas crédito semestrales como máximo). Se requiere el consentimiento del coordinador del programa UT-PACT. ([1-6] -0) S

BIOL 3V40 Temas en Biología Molecular y Celular (1-6 horas crédito semestrales) Pueden repetirse a medida que los temas varían (9 horas crédito semestrales como máximo). Requisitos previos: (BIOL 2281 o CHEM 2401 o equivalente) y BIOL 2311 y BIOL 2312 o equivalente. ([1-6] - [0-5]) S

BIOL 3V81 Medicina clínica I (1-6 horas crédito semestrales) Medicina clínica es un componente del programa UT Partnership in Advancing Clinical Transition (UT PACT) que aborda las competencias clínicas en la profesión médica, incluidas las habilidades de comunicación, la formación de identidad profesional, el trabajo en equipo interprofesional y ética médica. Los estudiantes participan en sesiones de grupos pequeños, tutorías clínicas y rotaciones de hospitales en UT Southwestern Medical Center. La inscripción está limitada a estudiantes que hayan completado al menos un año del Programa UT PACT. Crédito / Sin crédito solamente. Se requiere el consentimiento del asesor de UT PACT. ([1-6] - [1-9]) Y

BIOL 3V82 Clinical Medicine II (1-6 horas crédito semestrales) Clinical Medicine II aborda las competencias clínicas en la profesión médica, basándose en las habilidades ya abordadas en Clinical Medicine I y otras partes del plan de estudios de UT Partnership in Advancing Clinical Transition (UT PACT). Los temas que se abordarán incluyen la aplicación de la ciencia básica a la práctica clínica, las habilidades interpersonales en medicina, la competencia cultural y el profesionalismo y la ética médica en entornos clínicos. Los estudiantes participan en sesiones de grupos pequeños y tutorías clínicas y rotaciones en UT Southwestern Medical Center. La inscripción está limitada a estudiantes que hayan completado su segundo año en el programa UT PACT. Crédito / Sin crédito solamente. Se requiere el consentimiento del asesor de UT PACT. Requisito previo: BIOL 3V81. ([1-6] - [1-9]) Y

BIOL 3V83 Clinical Medicine III (1-6 horas crédito semestrales) Clinical Medicine III es una continuación de Clinical Medicine I y II que se ofrece a los estudiantes en el programa UT Partnership in Advancing Clinical Transition (UT PACT), que se tomará durante la tercer año académico en UT Dallas. La inscripción está limitada a estudiantes que hayan completado Medicina Clínica I y II, y al menos dos años del Programa UT PACT. Se requiere el consentimiento del asesor de UT PACT. ([1-6] - [1-9]) Y

BIOL 3V84 Clinical Medicine IV (1-6 horas crédito semestrales) Clinical Medicine IV es una continuación de Clinical Medicine I, II y III que se ofrece a los estudiantes en el programa UT Partnership in Advancing Clinical Transition (UT PACT) que se tomará durante tercer año académico de los estudiantes en UT Dallas. La inscripción está limitada a estudiantes que hayan completado Medicina Clínica I, II y III, y al menos dos años del Programa UT PACT. Crédito / Sin crédito solamente. Se requiere el consentimiento del asesor de UT PACT. ([1-6] - [1-9]) Y

BIOL 3V90 Lecturas de pregrado en biología (1-3 horas crédito semestrales) El tema y el alcance se determinarán de forma individual. Puede repetirse para crédito como temas varían. Se requiere el consentimiento del instructor. ([1-3] -0) S

BIOL 3V91 Investigación de pregrado en biología (1-3 horas crédito semestrales) El tema y el alcance se determinarán de forma individual. Puede repetirse para crédito como temas varían. Se requiere el consentimiento del instructor. ([1-3] -0) S

BIOL 3V93 Investigación de pregrado en bioquímica (1-3 horas crédito semestrales) El tema y el alcance se determinarán de forma individual. Puede repetirse para crédito como temas varían. Se requiere el consentimiento del instructor. ([1-3] -0) S

BIOL 3V94 Temas en Biología: Instrucción individual (1-6 horas crédito semestrales) Estudio individual bajo la dirección de un miembro de la facultad. Puede repetirse para crédito como temas varían. Se requiere el consentimiento del instructor. ([1-6] -0) S

BIOL 3V96 Investigación de pregrado en biología celular y molecular (1-3 horas crédito semestrales) El tema y el alcance se determinarán de forma individual. Puede repetirse para crédito como temas varían. Se requiere el consentimiento del instructor. ([1-3] -0) S

BIOL 4302 TA Aprendizaje (3 horas crédito semestrales) Desarrollo y práctica de habilidades docentes en el aula y laboratorio en ciencias biológicas. Puede repetirse solo una vez para obtener crédito (6 horas de crédito semestrales como máximo). Se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) S

BIOL 4305 Evolución Molecular (3 horas crédito semestrales) Este curso describe los principios y modelos de la teoría evolutiva a nivel molecular. Se centra principalmente en la evolución de secuencias de nucleótidos, incluidos genes, pseudogenes y genomas, así como en secuencias de aminoácidos utilizadas para estudiar la evolución de proteínas, complejos de proteínas e interacciones. Se discuten en detalle la filogenética y los principales modelos cuantitativos actuales de evolución de secuencias. También se estudian métodos recientes sobre la evolución de aminoácidos y sus conexiones con la estructura y función molecular. Los ejemplos relevantes de evolución molecular presentados en este curso incluyen interacciones de proteínas, redes de señalización y evolución viral. Los estudiantes aprenden herramientas computacionales y algoritmos utilizados para estudiar la evolución a nivel molecular y trabajan en un proyecto de investigación similar a una propuesta aplicando herramientas y conceptos aprendidos en clase para investigar nuevas preguntas de investigación en su área de especialización. Requisitos previos: BIOL 3301 y BIOL 3302. (3-0) S

BIOL 4310 Microbiología celular (3 horas crédito semestrales) El curso cubre temas relacionados con la patogénesis de enfermedades infecciosas en el contexto de las propiedades de la célula huésped. Introduce varios patógenos humanos y describe su virulencia, y explora los aspectos evolutivos de cómo los patógenos interactúan con sus células huésped y cómo las células huésped se defienden de los microorganismos invasores. Los temas incluyen toxinas bacterianas y mecanismos de secreción, infecciones por virus, invasión microbiana y parasitismo intracelular, manipulación de las funciones de la célula huésped e inducción de la muerte celular por patógenos, mecanismos de defensa innatos y adquiridos del huésped, inflamación, sepsis y avances de la genómica microbiana que involucra a humanos. microbioma, vacunas y antiinfecciosos. El curso tiene como objetivo complementar el conocimiento científico y los principios establecidos en biología celular, microbiología médica e inmunología con la relevancia adecuada para las aplicaciones clínicas que involucran parasitología y control de enfermedades infecciosas. Requisito previo: BIOL 2311. (3-0) Y

BIOL 4315 Genes, Enfermedad y Terapéutica (3 horas crédito semestrales) Este curso explora modelos de enfermedad genética comenzando con la base genética y viajando a través de la presentación clínica. También se tratan los enfoques terapéuticos, así como las cuestiones particulares relevantes para cada enfermedad. Estos problemas incluyen aspectos legales, exámenes prenatales y preocupaciones éticas. Requisitos previos: BIOL 2311 y BIOL 2312 y (BIOL 2281 o CHEM 2401 o equivalente). (3-0) S

BIOL 4317 Medicina celular y molecular de enfermedades humanas (3 horas crédito semestrales) Este curso está diseñado para proporcionar a los estudiantes de pregrado de nivel superior conocimientos actuales y enfoques experimentales (por ejemplo, modelos animales) de enfermedades humanas con énfasis en la base celular y molecular del cáncer, enfermedades metabólicas, inflamación y lesiones tisulares. Los estudiantes conocerán los avances más recientes en la investigación biomédica y las contribuciones de varios modelos animales a los estudios básicos y clínicos. También se espera que los estudiantes adquieran las habilidades necesarias para interpretar y presentar artículos de investigación de referencia recientes. Las sesiones incluyen conferencias, seminarios de conferenciantes invitados y presentación de artículos de revistas. Requisitos previos: (BIOL 3301 y BIOL 3302 y BIOL 3361) o se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) R

BIOL 4320 Migración celular en salud y enfermedad (3 horas crédito semestrales) La adhesión y migración celular desempeñan un papel importante en el desarrollo normal, las respuestas inmunitarias, la cicatrización y la regeneración de heridas. La migración desregulada subyace en muchas condiciones, incluidos los trastornos congénitos, la inflamación crónica y la invasión y metástasis del cáncer. Este curso examinará los mecanismos celulares y moleculares que subyacen a la adhesión y migración celular en estados normales, regenerativos y enfermos. Se discutirán los modelos de sistemas, herramientas y tecnologías que se utilizan para estudiar y analizar la migración celular. El curso incluirá conferencias didácticas, aprendizaje basado en la investigación y presentaciones de los estudiantes. Requisitos previos: (BIOL 3301 y BIOL 3302) y (BIOL 3361 o CHEM 3361) o equivalente o se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) S

BIOL 4325 Nutrición y metabolismo (3 horas crédito semestrales) Este curso examina la utilización y los requisitos de los nutrientes con un énfasis en los vínculos multifacéticos entre la dieta, la salud, la genética, el microbioma y las enfermedades. El curso tiene como objetivo apoyar los estudios hacia la medicina, las profesiones de la salud, la investigación biomédica y la biotecnología. Los temas cubren la base de los fenómenos fisiológicos nutricionales y la hemostasia metabólica en el contexto del desarrollo humano, el envejecimiento, el ejercicio, la salud y las enfermedades. Se revisa la integración del metabolismo energético y los requisitos fisiológicos relacionados con los macronutrientes y las principales vitaminas y minerales, así como los beneficios de los compuestos potencialmente protectores en los alimentos. Se discute cómo la ingesta desequilibrada de nutrientes contribuye al inicio, desarrollo y severidad de diversas enfermedades crónicas, incluyendo enfermedad coronaria, aterosclerosis, lipidemia, hipertensión, diabetes, obesidad, osteoporosis, trastornos de la tiroides, disfunción inmunológica, condiciones inflamatorias, cáncer y disbiosis. con relevancia para la nutrición clínica y la salud pública. El curso también introduce los campos de la microbiómica, la nutrigenómica, la nutrigenética y la crononutrición para explorar conceptos en evolución relacionados con la influencia de la dieta en la microbiota intestinal y el efecto de los alimentos y el sueño en el metabolismo y los genes. Requisitos previos: (BIOL 3361 y BIOL 3161) o equivalente y (BIOL 3362 y BIOL 3162) o equivalente. (3-0) S

BIOL 4330 Investigación avanzada en biología celular y molecular (3 horas crédito semestrales) Este curso tiene como objetivo mostrar a los estudiantes cómo realizar una investigación original y enseñarles algunos enfoques prácticos y técnicas utilizadas en un laboratorio de investigación. Se utilizarán enfoques y técnicas de investigación avanzada para investigar procesos moleculares y celulares fundamentales en células y organismos eucariotas. Las habilidades prácticas que se enseñarán y aplicarán incluyen las siguientes: crecimiento y monitoreo de cultivos bacterianos y de levadura, aislamiento de ADN plasmídico, análisis de digestión por restricción, clonación de ADN, reacción en cadena de la polimerasa (PCR), transformación de bacterias y levaduras con ADN. Las técnicas avanzadas incluyen microscopía fluorescente, beta-galactosidasa y ensayos de indicador fluorescente, cultivos de células cancerosas, extracción de proteínas, purificación de proteínas e inmunohistoquímica. Requisitos previos: BIOL 2281 y BIOL 2311 y BIOL 3302 y CHEM 2125. (1-5) S

BIOL 4337 Artículos fundamentales en biología (3 horas crédito semestrales) Los artículos teóricos y experimentales en áreas seleccionadas de biología se discutirán en un formato de seminario para estudiantes de último año. También se explorará el contexto histórico y biográfico de los artículos y sus autores. Las áreas que se cubrirán en cualquier semestre variarán con el instructor. Se espera que cada estudiante haga una presentación oral y prepare un trabajo escrito. Requisitos previos: (BIOL 3301 y BIOL 3302) y (BIOL 3361 o CHEM 3361) y (BIOL 3362 o CHEM 3362). (3-0) S

BIOL 4341 Genómica (3 horas crédito semestrales) Fundamentos de cómo se adquirió la secuencia del genoma humano y el impacto de la era del genoma humano en la investigación biomédica, la atención médica y las pruebas genéticas. También se cubre el impacto que tendrán las nuevas herramientas, como los microarrays de ADN, la PCR en tiempo real, la espectrometría de masas y la bioinformática en los enfoques sobre cómo se investigan las cuestiones científicas. La clase será una mezcla de conferencias didácticas y presentaciones de trabajos sobre ejemplos de genómica aplicada. Habrá dos laboratorios basados ​​en computadoras donde los estudiantes realizarán bioinformática en línea y minería de datos utilizando la base de datos pública de NCBI. Requisito previo: BIOL 3301 con una calificación de C o mejor. (3-0) T

BIOL 4345 Inmunobiología (3 horas crédito semestrales) Interacciones de antígenos y anticuerpos. Estructura fina de anticuerpos. Tejidos y células del sistema inmunológico. Respuesta de los linfocitos B y T a los antígenos. Interacciones celulares en la inmunidad humoral y mediada por células. Base genética de la diversidad de anticuerpos. Inmunidad y enfermedades infecciosas. Requisitos previos: CHEM 2323 y CHEM 2325 (Química Orgánica I y II). Preparación adicional sugerida: BIOL 3302. (3-0) T

BIOL 4350 Microbiología médica (3 horas crédito semestrales) Este curso cubrirá los métodos utilizados para la identificación de organismos patógenos y el estudio de estos organismos en relación con su proceso de enfermedad en humanos. También cubriremos conceptos importantes a nivel molecular como la virulencia microbiana, el control del crecimiento bacteriano y las respuestas del huésped a la infección. Requisito previo: BIOL 3301 o BIOL 3V20. (3-0) T

BIOL 4353 Biología molecular del VIH / SIDA (3 horas crédito semestrales) Los temas incluyen una discusión sobre la historia y epidemiología del SIDA, los orígenes probables del virus de inmunodeficiencia humana (VIH) y la biología molecular y celular de la replicación del VIH. Se examina la base biológica celular de la inmunodeficiencia inducida por la infección por VIH, así como la de patologías comunes que la acompañan, como el sarcoma de Kaposi. Se considera la base molecular de una variedad de terapias antivirales existentes y potenciales. Requisito previo sugerido: BIOL 3302. (3-0) T

BIOL 4356 Neuropatología molecular (3 horas crédito semestrales) El curso de Neuropatología molecular ofrece una visión de 360 ​​grados sobre las enfermedades neurológicas y las causas moleculares subyacentes. En este curso, analizaremos la patología del cerebro y el SNC en diversas enfermedades. Siguiendo una mirada a la patología, nos sumergiremos en los aspectos moleculares de las mismas enfermedades viéndolo desde el punto de vista genético y de estructura-función proteica. Nos encanta un formato de clase abierta y disfrutamos de los debates sobre los diversos temas del programa de estudios. Requisitos previos: BIOL 3301 y BIOL 3302 y (BIOL 3361 o CHEM 3361) o equivalente o se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) S

BIOL 4357 Neuropatología Molecular II (3 horas crédito semestrales) El curso de Neuropatología Molecular ofrece una visión de 360 ​​grados sobre las enfermedades neurológicas y las causas moleculares subyacentes. En este curso, analizaremos la patología del cerebro y el SNC en diversas enfermedades. Siguiendo una mirada a la patología, nos sumergiremos en los aspectos moleculares de las mismas enfermedades viéndolo desde el punto de vista genético y de estructura-función proteica. Nos encanta un formato de clase abierta y disfrutamos de los debates sobre los diversos temas del programa de estudios. Requisitos previos: BIOL 3301 y BIOL 3302 y (BIOL 3361 o CHEM 3361) o equivalente o se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) Y

BIOL 4360 Evolución y desarrollo (3 horas crédito semestrales) El objetivo del curso es integrar la biología evolutiva y la biología del desarrollo en un marco común, centrándose en la evolución de las vías del desarrollo como base para la evolución de la morfología animal. Este es un curso intensivo en lectura con un fuerte enfoque en la investigación científica. Prerrequisito o co-requisito: BIOL 3301. (3-0) S

BIOL 4365 Fisiología humana avanzada (3 horas crédito semestrales) Función e integración de sistemas de órganos humanos. El papel de estos sistemas en la adaptación de los seres humanos y su interacción con el medio ambiente. Mantenimiento y perturbación de la homeostasis. Bases fisiopatológicas de determinadas enfermedades. Requisito previo: BIOL 3302 o se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) R

BIOL 4366 Biología molecular del cáncer (3 horas crédito semestrales) El tema incluye una discusión de ejemplos representativos de las principales categorías de oncogenes de acción dominante. También se considera el papel en la oncogénesis de genes supresores de tumores ("oncogenes recesivos"), así como oncogenes antiapoptóticos como Bcl. Se examinarán las funciones que desempeñan las proteínas codificadas por estos genes en la transducción de señales de la hormona del crecimiento, la regulación de genes, la regulación del ciclo celular y la muerte celular programada. Los estudiantes también leerán y discutirán la literatura primaria en este campo. Requisito previo: BIOL 3302. (3-0) T

BIOL 4371 Virología general y molecular (3 horas crédito semestrales) ¿Qué es un virus? ¿Cuál es la base de la especificidad del virus / huésped? ¿Cómo se replican los virus? Este curso cubrirá la estructura, clasificación, expresión génica y replicación del virus. Una vez que hayamos cubierto los conceptos básicos utilizando algunos sistemas modelo seleccionados, consideraremos grupos seleccionados de virus de cada uno de los tres dominios de la vida y discutiremos en detalle la replicación del virus desde la unión hasta la liberación de viriones de la progenie (y / o destinos alternativos como la lisogenia , infecciones abortivas y otras). Este curso está diseñado para estudiantes de pregrado de nivel superior que tienen un conocimiento firme de los conceptos básicos de Central Dogma: transcripción, traducción, replicación, así como antecedentes en bacteriología y biología de células eucariotas. Se recomienda BIOL 3302, pero no es obligatorio. Requisitos previos: BIOL 3301 y (BIOL 3520 o BIOL 3V20) o se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) Y

BIOL 4380 Laboratorio de Biología Celular y Molecular (3 horas crédito semestrales) Técnicas actuales que se utilizan en un moderno laboratorio de investigación de biología molecular. Las habilidades prácticas que se enseñan incluyen monitorear el crecimiento bacteriano, pruebas de fenotipo, aislamiento de plásmidos, análisis de digestión de restricción, clonación de ADN y huellas dactilares de ADN mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Las técnicas avanzadas incluyen microscopía fundamental, transfección de ADN y caracterización general de cultivos de células animales, fraccionamiento subcelular mediante centrifugación diferencial, técnicas inmunológicas básicas y pruebas de mutágenos químicos. Prerrequisito: BIOL 3380. Prerrequisito o Correquisito: BIOL 3302. (1-4) S

BIOL 4385 Histología y Embriología Oral (3 horas crédito semestrales) Este curso proporcionará exposición y una amplia cobertura de las estructuras histológicas maxilofaciales y orales y la embriología de la cara, el cuello y los dientes mediante conferencias e imágenes electrónicas de células calcificadas y de tejidos blandos. Requisitos previos: (BIOL 3361 y (BIOL 3455 o BIOL 3456)) o se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) S

BIOL 4390 Lecturas para estudiantes de último año en biología molecular y celular (3 horas crédito semestrales) Para estudiantes que realizan investigaciones literarias independientes y redacción científica en biología o biología molecular y celular. El tema y el alcance se determinarán de forma individual. Los temas pueden variar. Se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) S

BIOL 4391 Investigación superior en biología celular y molecular (3 horas crédito semestrales) Para estudiantes que realizan investigaciones de laboratorio y redacción científica en biología o biología molecular y celular. Objeto y alcance a determinar de forma individual. Los temas pueden variar. Se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) S

BIOL 4399 Investigación con honores para tesis en biología celular y molecular (3 horas crédito semestrales) Para estudiantes que realizan investigaciones de laboratorio independientes para obtener honores en biología o biología molecular y celular. Además de las especificaciones de la universidad, el estudiante debe comunicarse con el asesor académico de pregrado en biología para conocer los requisitos del programa. Los temas pueden variar. Se requiere el consentimiento del instructor. (3-0) S

BIOL 4461 Química biofísica (4 horas crédito semestrales) Para estudiantes interesados ​​en la interfaz entre bioquímica y biología estructural. Proporciona un tratamiento avanzado de los principios físicos subyacentes a las técnicas modernas de biología molecular. Los temas incluyen termodinámica clásica y estadística, cinética bioquímica, procesos de transporte (por ejemplo, difusión, sedimentación, viscosidad), enlaces químicos y espectroscopía. Requisitos previos: ((MATH 2413 y MATH 2414) o MATH 2417) y (PHYS 1301 o PHYS 2325 o equivalente) y (BIOL 3361 o CHEM 3361). (4-0) Y

BIOL 4V00 Temas especiales en biología (1 a 6 horas crédito semestrales) Se pueden repetir ya que los temas varían (9 horas crédito semestrales como máximo). Requisitos previos: (BIOL 3301 y BIOL 3302) y (BIOL 3361 o CHEM 3361) o equivalente o se requiere el consentimiento del instructor. ([1-6] -0) S

BIOL 4V01 Temas en Ciencias Biológicas con Laboratorio (1-6 horas crédito semestrales) Pueden repetirse a medida que los temas varían (máximo 6 horas crédito semestrales). Requisitos previos: (BIOL 3301 y BIOL 3302) y (BIOL 3361 o CHEM 3361) o equivalente o se requiere el consentimiento del instructor. ([1-5] - [1-5]) R

BIOL 4V40 Temas especiales en biología celular y molecular (1 a 6 horas crédito semestrales) Se pueden repetir a medida que los temas varían (9 horas crédito semestrales como máximo). Requisitos previos: (BIOL 3301 y BIOL 3302) y (BIOL 3361 o CHEM 3361) o equivalente o se requiere el consentimiento del instructor. ([1-6] - [0-5]) S

BIOL 4V95 Temas avanzados en biología (instrucción individual) (1-6 horas crédito semestrales) Estudio individual bajo la dirección de un miembro de la facultad. Puede repetirse para crédito como temas varían. Se requiere el consentimiento del instructor. ([1-6] -0) S

BIOL 4V99 Investigación con honores de último año en biología molecular y celular (3-6 horas crédito semestrales) Para estudiantes que realizan investigaciones independientes para proyectos o tesis de honor. Además de las especificaciones de la universidad, el estudiante debe comunicarse con el asesor de pregrado en biología para conocer los requisitos del programa. Puede repetirse para crédito como temas varían. Se requiere el consentimiento del instructor. ([3-6] -0) S


BIOLOGÍA, 3ra Ed./ EN VIVO: Edmondson (Opción 3)

25 de agosto de 2021 a las 9 a.m., tiene una duración de 32 semanas

* Planes de pago fácil: $ 84 / mes *(detalles abajo)

Recomendación de grado: 8-10

Dirigido por un maestro y calificado por Becky Edmondson, B.S. Biología (Pre-Med):

  • Clase en vivo: Semanalmente Miércoles 9: 00-10: 30 AM ET, o
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Fechas del curso: Del 25 de agosto al 18 de mayo

Costo: $ 588 (+ $ 50 de tarifa de registro, no reembolsable)

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Correo electrónico del instructor: [email protected]

Más información: Sin requisitos previos. Descripción de la clase y biografía del maestro

Notas: ¿Tiene problemas para ingresar su dirección fuera de EE. UU.?

* Cantidad aproximada si se registra antes del 31 de marzo de 2021. Los planes de pago variarán según la fecha de registro. Pago final a más tardar el 31 de octubre de 2021. Puede solicitar un calendario de pago personalizado DESPUÉS de registrarse.


Medición de respuestas biológicas con microscopía automatizada

Christine C. Hudson,. Carson R. Loomis, en Métodos en enzimología, 2006

Satisfacer la demanda de detección de alto rendimiento con Transfluor

Los ensayos de detección de alto rendimiento deben predecir la farmacología de un compuesto de prueba en su objetivo, ser simples y fáciles de realizar, robustos y automatizables. Se ha demostrado que el ensayo de translocación arrestinaGFP cumple con todos estos requisitos. Primero, se ha utilizado con éxito para determinar la farmacología de agonistas y antagonistas conocidos para varios GPCR (Ghosh et al., 2005 Oakley et al., 2006). A continuación, el ensayo Transfluor se realiza fácilmente porque implica unos pocos pasos básicos (Fig. 6). A diferencia de otros ensayos de detección de alto contenido, que requieren incubaciones y lavados de anticuerpos primarios y secundarios después de la fijación celular, no se necesitan pasos de lavado con Transfluor. Además, todos los pasos del ensayo se automatizan fácilmente mediante robótica de manipulación de líquidos, como MultiDrops y MiniTraks, y la detección de los resultados del ensayo se ha validado en múltiples plataformas automatizadas de imágenes fluorescentes (Oakley et al., 2006). Además, el ensayo es muy reproducible y proporciona excelentes estadísticas de detección, que incluyen Z valores primarios superiores a 0,5, lo que garantiza una ventana de ensayo de detección óptima.

Figura 6. Pasos del protocolo de detección de transfluor con robótica de manipulación de líquidos asociada.


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