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Reacción en cadena de la polimerasa - PCR



PCR: importante técnica genética

¿Qué es (definición)

La técnica de PCR se basa en la amplificación, in vitro, de una única secuencia de ADN millones de veces.

Básicamente, ella hace varias copias del fragmento de ADN de interés que será estudiado.

Ejemplo

Si miramos solo el ADN extraído de una célula, sería extremadamente difícil encontrar un fragmento de interés; En otras palabras, sería casi imposible identificar esa parte particular del ADN.

Dicho simplemente, puede decir que a través de la técnica de PCR es posible "tararear" y ver solo esa parte que importa.

Aplicaciones

Las aplicaciones de la técnica de PCR son muchas y en las áreas más diferentes. Aquí hay algunos ejemplos:

- Diagnóstico de enfermedades infecciosas y genéticas;

- Determinación de la variabilidad genética;

- Sexado de embriones;

- Estudio de la expresión génica;

- investigación forense;

- Determinación del linaje animal;

- Identificación de patógenos, paternidad, etc.

Como sucede

La PCR ocurre en tres pasos y todos dependen de un gradiente de temperatura.

Paso 1: desnaturalización (a 95 ° C) de la doble cadena de ADN, que ocurre debido al aumento de la temperatura.

Paso 2: Cebado (57ºC a 63ºC) de los cebadores, que puede ocurrir en un rango de temperatura entre 57ºC a 63ºC.

Paso 3: Extensión (a 72 ° C) con la operación de Taq Polymerase, que ayuda en la introducción de nucleótidos que complementarán la cadena que se sintetiza.

Conclusión

Una PCR normal tiene aproximadamente 36 ciclos, cada uno de los cuales abarca los tres pasos descritos anteriormente. Y con cada ciclo existe la multiplicación o amplificación exponencial de la cantidad de moléculas de ADN.

Por ejemplo, si en el primer ciclo comenzamos la PCR con una sola molécula de ADN, al final tendremos dos moléculas. Al final del segundo ciclo tendremos cuatro. Al final del tercero tendremos ocho moléculas y de manera exponencial.

Al final de los 36 ciclos tendremos miles de millones de copias de ADN que se pueden analizar en el laboratorio. Este análisis se llevará a cabo mediante el uso de Electroforesis.